超微量分光光度計在要求較高的分析測試工作中，紫外可見分光光度計的雜散光應優(yōu)于0.05%，這樣可保證儀器有較寬的線性動態(tài)范圍。雜散光通常在紫外區(qū)。實際測試時，應檢測整個光譜區(qū)的兩個端點的雜散光。紫外可見分光光度計的光度噪聲與掃描速度有很大關(guān)系。一般來講，掃描速度快的紫外可見分光光度計的噪聲也大。大屏幕紫外分光光度計的基線平直度是指每個波長上的光速噪聲。測基線平直度時，掃描速度用慢速。
超微量分光光度計安裝環(huán)境的要求有：
（1）實驗室環(huán)境要求：主要包括環(huán)境溫濕度、環(huán)境潔凈狀況、光及磁場干擾等。具體要求如下：
①環(huán)境溫濕度 儀器應安放在干燥的房間內(nèi)，使用溫度為5～35℃，相對濕度不超過85%，應控制在45%～65%，無冷凝。如有條件，應配備去濕機（空調(diào)）、濕度計等，在相對濕度較大的地區(qū)應在儀器周圍放一些干燥劑。
②無強光干擾及磁場干擾 室內(nèi)照明不宜太強，且避免直射日光的照射。儀器應盡量遠離高強度的磁場、電場及發(fā)生高頻波的電器設備，防電磁干擾。
③防止腐蝕性氣體 避免在有硫化氫、：二氧化硫以及各種酸霧等腐蝕性氣體的場所使用，以免侵蝕儀器的約部件。
在使用超微量分光光度計時，需要注意一些使用的維護措施：
1、使用的吸收池必須潔凈，并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時，手指應拿毛玻璃面的兩側(cè)，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發(fā)性溶液時應加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。
4、測定時除另有規(guī)定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰±2nm以內(nèi)，測幾個點的吸收度或由儀器在規(guī)定的波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度zui大的波長作為測定波長，除另有規(guī)定外吸收度zui大波長應在該品種項下規(guī)定的測定波長±2nm以內(nèi)。
5、選用儀器的狹縫寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度值會偏低，狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準，對于大部分被測品種，可以使用2nm縫寬。
超微量分光光度計為了測量不同方向上的光強，上海光度計將燈具安裝在分布光度計上，以便于將其定位在規(guī)定的角度。分布光度計通常由一個用以支撐和定位燈具或光源以及光度探頭的機械裝置，連同一些獲取和處理數(shù)據(jù)的輔助設備組成。
上海光度計基本上可以分為三種：
一種使燈具繞兩根相互垂直的軸旋轉(zhuǎn)，且兩根軸的交點是分布光度計光度中心的分布光度計這類分布光度計通常使用一個單獨的且安裝在離光度中心距離足夠遠的光度計探頭。
一種分布光度計，燈具僅繞一根軸旋轉(zhuǎn)，燈具與光度探頭的相對運動，光度探頭在穿過分布光度計的光度中心面內(nèi)相對于*根軸的角度并跨越*根軸，繞第二根軸作第二種旋轉(zhuǎn)。
一種燈具*不動的分布光度計。光度探頭繞兩根穿過分布光度計光度中心且相互垂直的軸旋轉(zhuǎn)。
超微量分光光度計的使用方法
1.選擇測定波長
2.接通電源開關(guān)，把黑體放在*格并置于光路中，合上樣品室暗箱蓋，模式處于T 狀態(tài)下預熱20分鐘；（斷開光路）
3.將裝有參比溶液和被測樣品的比色皿依次置于樣品室中（參比置于第二個格）。
4.調(diào)0%T：將黑體置于光路中，T 應為0%，否則調(diào)“0%T”按鍵使顯示為000。
5.調(diào)Ｔ＝100％：將參比溶液置于光路，T 應為，否則調(diào)節(jié)“100％Ｔ”按鍵，使指針指在Ｔ＝100％。（注意：不測定溶液吸光度時，應把黑體置于光路，防止光照長時間照射檢測器）。
6. 樣品的測定：把模式設置為A ，將樣品液依次處于光路中，分別記下被測樣品的吸光度。
7.測量完畢，及時取出比色皿，用水洗干凈后倒置于濾紙上晾干，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈，關(guān)掉電源，儀器恢復至初始狀態(tài)。
8.填寫儀器使用記錄表
大屏幕紫外分光光度計由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，UV-3802準雙光束紫外可見分光光度計可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或 測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
超微量分光光度計的使用經(jīng)驗
1、幾乎所有的光譜分析儀器都是依據(jù)的朗伯-比耳定律。
2、很多藥品要求相對誤差在1%以內(nèi)。
3、若石英比色皿QC的配對誤差為0.1%T，則給使用者帶來的分析誤差為0.5%。若QC的配對誤差為0.5%，則分析誤差為3%。
4、大屏幕紫外分光光度計分析測試時，注進比色皿的溶液不要太滿，一般到比色皿高度的2/3即可。
5、一般的光電檢測器如硅光電池、光電管、光電倍增管有疲憊效應，應避免長時間照射、預熱時，打開樣品室蓋，防止光電檢測器受光疲憊。
6、光譜帶寬以nm計，狹縫寬度以mm計。
7、波長正確度在某種程度上，決定光度正確度。
8、噪聲限制紫外可見分光光度計對樣品分析濃度的下限，并直接影響儀器的信噪比。雜散光直接限制被分析測試樣品濃度的上限。
9、雜散光對參比光束和樣品光束的影響是相同的。
10、在要求較高的分析測試工作中，紫外可見分光光度計的雜散光應優(yōu)于0.05%，這樣可保證儀器有較寬的線性動態(tài)范圍。
11、雜散光通常在紫外區(qū)。實際測試時，應檢測整個光譜區(qū)的兩個端點的雜散光。
12、紫外可見分光光度計的光度噪聲與掃描速度有很大關(guān)系。一般來講，掃描速度快的紫外可見分光光度計的噪聲也大。
13、大屏幕紫外分光光度計的基線平直度是指每個波長上的光速噪聲。測基線平直度時，掃描速度用慢速。
14、紫外可見分光光度計的線性動態(tài)范圍取決于儀器的雜散光與噪聲。
15、為了得到更好的光度正確度，在分析過程中，特別要留意選擇試樣的zui大吸收峰處的波長作為測試波長。
16、選擇光譜帶寬的原則是，在一定的實驗條件下，測試吸光度隨光譜帶寬的變換，以獲得zui大吸光度值的光譜帶寬作為欲選擇的光譜帶寬。
17、判定被測試樣是否有光解現(xiàn)象，首先要看測試數(shù)據(jù)的變化規(guī)律，對同一個試樣多次丈量，看其吸光度值是否都是向同一個方向變化，假如是，就可能有光解現(xiàn)象。
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更新時間：2019-03-26
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